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α和β地贫不能直接比较哪个遗传给宝宝比较严重，因为地贫要区分轻度、中度、重度地贫。如果α地贫和β地贫都是属于轻度那么遗传给宝宝都不严重，轻度地贫即使遗传给宝宝身体也不会出现明显的症状。

但是中度和重度的α和β地贫无论哪一个遗传给宝宝都一样严重，宝宝会出现一系列严重的并发症，比如都会出现严重的溶血性贫血、肝脾肿大、黄疸、营养不良。宝宝遗传上中重度的α和β地贫随时都会有生命危险。所以不能直接的比较α和β地贫哪个遗传给宝宝严重。下面是α、β遗传给宝宝的症状：

α地贫β地贫遗传的区别
轻型症状中度症状重度症状α地贫基本无症状持续性的黄疸、肝脾增大库氏面容、肝脾明显肿大β地贫基本无症状颅骨长骨皮质层变薄、黄疸慢性进行性贫血、肝脾肿大

在一些微生物实验室或者需要无菌操作的场所，想了解灭菌的具体效果就需要生物指示物的帮助。通常灭菌指的是用物理或化学的方式将目标微生物全部杀灭，使之达到无菌保障水平，一般最常用的有化学试剂、射线、湿热、干热以及过滤等除菌手段。针对不同的微生物采用的方法也不一样。而想要验证这些方法的效果，就需要一些具有灭菌耐受力的活微生物作为指示物来进行判断。

今天我们要讲的枯草芽孢杆菌黑色变种主要用于各类医疗机构及制药工业领域的消毒效果验证中，其原理是经过灭菌处置后含有枯草芽孢杆菌黑色变种的水样在通过孔径为0.45um的滤膜后，细菌和芽孢被截留在滤膜上，然后将滤膜置于酪氨酸琼脂培养基上，36℃±1℃培养72h-96h，枯草芽孢杆菌黑色变种产生的酪氨酸酶可分解并利用酪氨酸形成黑色素，产生黑色的特征菌落。对特征菌落进行染色镜检后通过生化试验做进一步鉴定，能利用甘油和甘露糖，可还原硝酸盐和水解淀粉，不能利用苦杏仁苷和甘露醇，并确认为革兰氏阳性芽孢杆菌的特征菌落为枯草芽孢杆菌黑色变种，鉴定结果为阳性。

检测所用试剂>

1.酪氨酸琼脂培养基。

2.营养琼脂培养基。

3.淀粉培养基和碘液。

4.硝酸盐还原培养基和相关试剂。

5.甘油复红肉汤培养基。

6.甘露糖生化培养基。

7.甘露醇生化培养基。

8.苦杏仁苷生化培养基。

9.革兰氏染色液。

10.芽孢染色液。

11.阴性对照菌：如地衣芽孢杆菌。

12.阳性对照菌：枯草芽孢杆菌黑色变种。

13.枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢悬液

按照《消毒技术规范》的规定制备，也可购买浓度范围在106CFU/ml-109CFU/ml之间的市售枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢悬液。

14.无菌滤膜：直径50mm，孔径0.45μm的醋酸纤维滤膜。

按无菌操作要求包扎，经121℃高压蒸汽灭菌20min，晾干备用；或将滤膜放入烧杯中，加入实验用水，煮沸灭菌3次，15min/次，前2次煮沸后需换水洗涤2-3次。也可采用市售的无菌滤膜。

15.石蜡质封口膜。

16.无菌水：取适量实验级纯水，经121 ℃高压蒸汽灭菌20 min，备用。

检测所需试剂>

1.样品瓶：螺口带盖或磨口具塞的250ml、500ml广口玻璃瓶。

2.恒温培养箱：36℃±1℃。

3.高压蒸汽灭菌器：121℃，可调。

4.pH计：准确到0.1pH单位或更高精度。也可使用pH精密试纸。

5.显微镜：物镜4×或5×、10×、20×、40×，油镜100×，目镜10×或15×。

6.分析天平：实际分度值0.0001g。

7.培养皿：直径90mm。

8.过滤装置：配有砂芯滤器、圆筒形玻璃漏斗和真空泵，抽滤压力不低于-50kPa。

9.接种环：直径1mm-3mm。

10.镊子：不锈钢或一次性无菌塑料镊子。

11.刻度移液管：1ml、10ml。也可使用可调式移液器。

12.量筒：100ml。

13.锥形瓶：100ml。

14.酒精灯。

15.试管：10ml。

16.无菌操作设备：无菌室、超净工作台、生物安全柜。

17.一般实验室常用仪器和设备。

水样采集>

评价使用高温高压灭菌设备的灭菌效果时，取样品瓶，加入枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢悬液及200ml无菌水使混合液中枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢终浓度达到5×104CFU/ml-5×105CFU/ml。灭菌处置完毕后，取出样品瓶，对水样进行灭菌生物指示物（枯草芽孢杆菌黑色变种）的检测。

评价使用其它灭菌设备的灭菌效果时，灭菌前取适量枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢悬液加入灭菌设备，使水样中枯草芽孢杆菌黑色变种芽孢终浓度达到5×104CFU/ml-5×105CFU/ml。灭菌处置完毕后，从灭菌设备中采集水样，进行灭菌生物指示物（枯草芽孢杆菌黑色变种）的检测。采样量一般为样品瓶容量的80%左右，不得用样品洗涤样品瓶。样品采集完毕后，迅速用无菌包装纸包扎样品瓶。

样品采集后宜在2h内检测，否则应在10℃以下冷藏保存运输，但不得超过6h。实验室接收样品后，不能立即开展检测的，样品应在4℃以下冷藏保存，并在2h内检测。

水样过滤>

用无菌镊子以无菌操作夹取无菌滤膜贴放在已灭菌的过滤装置上，固定好过滤装置。将样品充分混匀后取100 ml 抽滤，以无菌水冲洗滤器内壁2-3 次。样品过滤完成后，再抽气约5s，关上开关。过滤前按照无菌操作要求调节样品的pH值至7.0-8.0。

培养流程>

用灭菌镊子夹取滤膜移放在酪氨酸琼脂培养基上，滤膜截留细菌面向上，滤膜应与培养基完全贴紧，两者间不得留有气泡，然后用石蜡质封口膜封好培养皿，倒置培养皿，放入恒温培养箱内，36℃±1℃培养72h-96h。

培养96h后，如培养基上未有菌落生长，则试验终止；如培养基上有菌落生长，则挑取黑色的特征菌落于营养琼脂培养基上，36℃±1℃培养24h，待鉴定。同时将已挑菌落的酪氨酸琼脂培养基培养皿储存于2℃-5℃，以备必要时复查。

染色镜检>

挑取黑色或可疑菌落，分别使用革兰氏染色液和芽孢染色液染色，枯草芽孢杆菌黑色变种革兰氏染色镜检以及芽孢染色镜检可以参考相关镜检图，枯草芽孢杆菌黑色变种为革兰氏阳性菌，营养细胞呈杆状，单个或呈短链状排列。

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生化实验>

挑取黑色或可疑菌落，分别接种到淀粉培养基、硝酸盐还原培养基、甘油复红肉汤培养基、甘露糖生化培养基、甘露醇生化培养基和苦杏仁苷生化培养基上。

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空白对照实验>

用无菌水按照过滤和培养步骤进行操作；培养96h后平板培养基上应无菌落生长，否则，该次样品鉴定结果无效，应查明原因后重新采样和检测。

阴性及阳性对照>

将阴性对照菌和阳性对照菌制成浓度为40CFU/L-600CFU/L的菌悬液，分别按照过滤、培养、实验的步骤操作。阴性、阳性对照菌呈现的生化反应结果应与参照表所列结果一致，否则该次水样鉴定结果无效，此时查明原因后重新采样和检测。

结果判断>

100ml水样中检出枯草芽孢杆菌黑色变种，即可断定灭菌不合格；而如果在100mL水样中未检出枯草芽孢杆菌黑色变种，可评价为灭菌合格。

5cb的冻囊胚移植成功率并不是很高，因为5cb囊胚质量不算优质，不过也不是最差的，临床上还是有移植成功的，如果没有更好质量的囊胚，也是可以尝试移植的。其实囊胚质量等级虽然对于移植成功率有影响，但也不全是，移植成功率还受患者的子宫环境、内膜厚度以及年龄等等这些因素影响，所以大家也不必太纠结成功率，只要医生说能移植就移植试试。

5cb囊胚质量属于中等偏下，此时囊胚处于正在孵出的状态，囊胚的一部分正在从透明带破裂口孵出，其内细胞数目很少，滋养层细胞较少，结构松散。移植后还是比较容易着床的，但是移植操作难度要大一点，所以总的来说成功率不是很高，但临床上也有成功案例。

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